分子伴随诊断是临床预测患者响应免疫药物几率的核心环节，其中，基于肿瘤组织细胞的程序性死亡配体-1（programmed cell death-Ligand 1，PD-L1）表达水平评估免疫治疗获益性是目前最常见与最成熟的手段。不幸的是，部分晚期患者不满足手术或穿刺指征导致无法获取肿瘤组织样本，因此亟需开发依托于液体活检技术的免疫用药指导方案。

    允英医疗联合上海市瑞金医院开展临床科研攻关，借助于允英自主研发的采血管产品、RNAplus™高效RNA提取技术、Alldetect™ qPCR检测平台以及IHC检测平台，对比了PD-L1在胃肠癌患者血浆样本与肿瘤组织样本间的表达关联性，并首次明确血浆PD-L1表达可能是胃癌患者响应帕博利珠单抗（Pembrolizumab，可瑞达）治疗的重要预测指标。

    为了探索基于血液样本检测PD-L1的液体活检方案是否可行，本研究首先在TCGA（The Cancer Genome Atlas）公共数据库中调查了胃癌（stomach adenocarcinoma，STAD）、结肠癌（colon adenocarcinoma，COAD）以及直肠癌（rectum adenocarcinoma，READ）患者肿瘤组织中PD-L1表达水平与患者特征间的相关性。结果表明，PD-L1在胃肠道肿瘤组织中的表达水平不受患者的年龄、性别等因素影响。此外，尽管PD-L1表达水平与结肠癌患者肿瘤分期、直肠癌患者一线治疗预后存在显著相关性（p < 0.05），但总体上并未发现不同PD-L1表达水平的胃肠癌患者间存在统计学显著的生存期差异，提示胃肠癌患者总生存时间与患者PD-L1表达间不具有相关性，初步明确了不同患者间基线差异不会干扰PD-L1表达定量结果。

    研究队列由52名胃肠癌患者构成，入组人员均使用允英采血管采集10 mL血液样本，同时还提供了配对肿瘤组织样本作为对照。患者队列按照不同病理类型分为胃癌（23人，44.2%）、结肠癌（19人，36.5%）与直肠癌（10人，19.2%），依托允英IHC检测平台完成了组织中PD-L1表达水平，并以1%作为cut-off阈值将不同病理患者细分为PD-L1 IHC阴性与阳性队列。值得注意的是，无论胃癌，结肠癌还是直肠癌，PD-L1 IHC表达检测或qPCR检测结果均与组织样本中肿瘤细胞含量无显著相关性，继续排除了由样本中肿瘤细胞数量差异造成的潜在干扰因素。

    随后，本研究对比了不同方法检测PD-L1表达水平的一致性。结果提示，经组织IHC评估的阳性组胃肠癌患者中，采取qPCR定量法获得的PD-L1表达水平也相对较高，尽管这一趋势并未表现出统计学显著性差异。有趣的是，在进一步对比了依托于qPCR平台所分别获取的血液与组织样本中PD-L1表达定量结果后，我们发现，仅有胃癌患者队列表现出弱线性相关（p < 0.05）性，肠癌队列则无论结肠癌还是直肠癌不同样本中检测的一致性均较差，提示血液PD-L1可能是一个独立的评价指标。

    为了验证血液PD-L1表达水平的临床意义与预测价值，本研究再次前瞻性招募了15例胃癌患者，所有患者治疗前均按照上述实验设计流程提供10 mL血液样本并检测了PD-L1表达状况，然后接受了标准帕博利珠单抗（Pembrolizumab，可瑞达）治疗。三个疗程后，依据患者疾病进展状况评估了患者对免疫治疗药物PD-1抑制剂的响应率。结果发现，相比于预后差组（疾病稳定或疾病进展），预后好组（疾病部分缓解）胃癌患者在接受治疗前血中PD-L1表达水平明显高于前者，差异具有统计学显著性（p < 0.05）。此外，这15名患者的ROC曲线数据显示，基于血液PD-L1表达水平预测的胃癌患者响应免疫治疗几率，其特异性与敏感性分别能够达到75%和85.7%。